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ELISA试剂盒血清样本如何处理?

在ELISA实验中,血清样本的处理方法对实验结果具有重要影响。以下是一些建议和注意事项:
1. 采集血清样本:在采集血液样本时,应选择合适的采血管。避免使用抗凝管,因为抗凝剂会影响血清的分离。建议使用带分离胶的采血管或添加适当的促凝剂。
2. 充分凝固:血液采集后,需在37℃温箱中静置30分钟,使血液充分凝固。避免在血液还未开始凝固时强行离心分离血清,以免血清中残留纤维蛋白原,导致假阳性结果。
3. 离心分离血清:将静置后的采血管在离心机上离心,通常离心转速为1000g,离心时间为15分钟。离心后,血清位于血块上方,用移液器小心地取出血清,尽量避免触及血块。
4. 避免溶血:在采集、运输和处理血清样本的过程中,要尽量避免溶血。溶血会导致红细胞释放过氧化物酶活性物质,从而增加非特异性显色。如有溶血现象,可在离心后取上清液,或用生理盐水稀释后重新离心。
5. 过滤:若血清样本混浊或有沉淀,应先进行离心或过滤,澄清后再进行ELISA检测。
6. 保存:血清样本在4℃下可保存5天,超过一周需在-20℃下保存。保存时应避免反复冻融,以免影响抗体效价。在保存血清样本时,应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
7. 检测前处理:在进行ELISA实验前,需对待测血清样本进行适当处理,如稀释、酶解等。具体处理方法应根据实验要求和试剂盒说明进行操作。
通过以上方法,可以有效处理ELISA实验中的血清样本,提高实验结果的准确性和可靠性。在实验过程中,还需仔细阅读试剂盒说明书,并遵循厂家的建议和操作步骤。
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