ELISA(酶联免疫吸附实验)是一种常用的生物化学技术,用于检测特定抗原或抗体在样品中的浓度。以下是 ELISA 实验的详细操作步骤:
1. 准备好所需的试剂和器材,包括抗原或抗体、酶标记的二抗、洗涤液、底物溶液、终止液、酶标仪等。
2. 按照实验设计将抗原或抗体吸附在微孔板上的聚合物上。通常是将抗原或抗体溶液浸泡在微孔板中,并在 4℃过夜。
3. 洗涤微孔板,去除未结合的抗原或抗体。通常使用洗涤液进行多次洗涤。
4. 加入酶标记的二抗,让其在室温下与微孔板中的抗原或抗体结合。通常孵育 30 分钟到 1 小时。
5. 再次洗涤微孔板,去除未结合的酶标记二抗。
6. 加入底物溶液,让其在酶标记二抗的存在下转化为有色产物。通常孵育 30 分钟到 1 小时。
7. 加入终止液,终止底物反应。通常是一种硫酸盐溶液,可以使有色产物不再生成。
8. 读取微孔板中的吸光度值,使用酶标仪测定。吸光度值与抗原或抗体的浓度成正比。
9. 绘制标准曲线,根据吸光度值计算出抗原或抗体的浓度。
注意:ELISA 实验的操作步骤可能因不同的抗原或抗体、实验目的和实验条件而略有不同。此外,实验过程中需要注意卫生,避免污染。
详细操作步骤还请联系上海森兴研生物科技有限公司销售获取!