ELISA微孔板是酶联免疫吸附测定（ELISA）实验中的核心耗材，通常为多孔塑料板，用于固定抗原/抗体、进行反应及检测。其设计直接影响实验的灵敏度和准确性。以下从类型、规格及应用范围展开说明：
---
一、ELISA微孔板的类型
1. 按表面处理分类
| 类型 | 表面特性 | 适用场景 |
|----------------|-----------------------------------------------------------------------------|----------------------------------------------------------------------------|
| 高结合型 | 表面经亲水化处理（如羧基化、氨基化），蛋白吸附能力强 | 适用于低浓度抗原/抗体的固定（如夹心ELISA、竞争ELISA）|
| 中结合型 | 普通聚苯乙烯表面，蛋白吸附能力适中 | 常规ELISA（如间接法、直接法），用于中高浓度目标物的检测 |
| 低结合型 | 表面疏水或惰性处理（如牛血清白蛋白预封闭），减少非特异性吸附 | 避免非特异性结合的实验（如检测含高浓度杂蛋白的样本|
2. 按检测方式分类
| 类型 | 颜色/材质 | 检测方法 |
| 透明板 | 无色透明聚苯乙烯 | 比色法（如TMB、pNPP显色），通过吸光度（OD值）测量（波长450nm/405nm） |
| 白色板 | 白色不透明 | 化学发光检测（如鲁米诺底物），增强光信号的反射效率 |
| 黑色板 | 黑色不透明 | 荧光检测（如FITC、Cy5标记），减少背景荧光干扰 |
3. 按实验需求分类
| 类型 | 特点 | 应用 |
| 预包被板 | 已包被特定抗原/抗体（如抗人IgG、病毒抗原） | 直接使用，省去包被步骤（如商业化ELISA试剂盒） |
| 可拆卸板（条板）| 微孔板可拆卸为单条（8孔或12孔/条） | 灵活处理小样本量，降低成本 |
| 无菌板 | 经γ射线灭菌，无DNase/RNase | 细胞培养相关ELISA（如检测细胞分泌的细胞因子） |
二、ELISA微孔板的规格
1. 孔数与排布
| 规格 | 孔数 | 排布方式 | 适用场景 |
| 96孔板 | 8×12孔 | 标准8排×12列 | 常规ELISA实验（检测通量适中） |
| 384孔板 | 16×24孔 | 高密度微孔 | 高通量筛选（HTS）、药物开发、大规模样本筛查 |
| 24孔板 | 4×6孔 | 大孔设计 | 预实验优化、低样本量检测 |
2. 孔型与容量
| 孔型 | 特点 | 容量范围 | 适用场景 |
| 平底孔 | 底部平坦，光程均一 | 200-400μL/孔 | 比色法检测（需均一光路） |
| U型底孔 | 底部为圆弧形，适合混合液体 | 300-500μL/孔 | 样品孵育、洗涤（减少液体残留） |
| V型底孔 | 尖底设计，便于液体集中 | 50-200μL/孔 | 小体积反应（如化学发光ELISA） |
3. 材质
| 材质 | 特点 | 适用场景 |
| 聚苯乙烯（PS） | 高透明度、成本低、易加工 | 常规ELISA（比色法） |
| 聚丙烯（PP） | 耐高温、化学稳定性高 | 高温包被（如>37℃）或有机溶剂环境 |
三、应用范围
1. 医学诊断
- 传染病检测：HIV抗体、乙肝表面抗原（HBsAg）、新冠病毒抗体等。
- 自身免疫病：类风湿因子（RF）、抗核抗体（ANA）。
- 肿瘤标志物：AFP（甲胎蛋白）、CEA（癌胚抗原）。
2. 生物研究
- 蛋白定量：BCA法、Bradford法（需预包被标准品）。
- 细胞因子检测：IL-6、TNF-α（使用预包被抗体板）。
- 信号通路研究：磷酸化蛋白检测（如Phospho-ERK ELISA）。
3. 制药与工业
- 药物开发：抗体药物效价测定（如Anti-drug Antibody, ADA）。
- 质量控制：疫苗抗原含量检测、生产工艺残留物（如宿主细胞蛋白）。
4. 其他领域
- 食品安全：过敏原（花生蛋白、麸质）、毒素（黄曲霉毒素）。
- 环境监测：水中农药残留、重金属结合蛋白检测。
---
四、选型建议
1. 根据检测方法选择颜色：比色法用透明板，化学发光用白色板，荧光用黑色板。
2. 根据样本浓度选择表面处理：低浓度样本需高结合板，高浓度样本可用中/低结合板。
3. 高通量需求选384孔板：适合药物筛选或大规模流行病学研究。
4. 预包被板省时但成本高：适合标准化检测（如试剂盒），自包被板灵活但需优化条件。
---
通过合理选择ELISA微孔板的类型和规格，可显著提升实验效率和数据可靠性，满足从基础研究到临床诊断的多样化需求。
